密度梯度離心是分子的分離,其中分離基于分子在離心力下通過密度梯度時的分子密度。
密度梯度離心原理
-
密度梯度離心基于以下原理:分子在離心力作用下沉降直至到達密度與它們相同的介質。
-
在這種情況下,使用具有密度梯度的介質,該介質必須減小密度或增大密度。
-
當樣品旋轉時,樣品中的分子會穿過介質,從而產生離心力。
-
當密度更高的分子通過密度梯度時,它們開始向底部移動。
-
然后,分子在顆粒密度等于周圍介質的點處懸浮。
-
以這種方式,具有不同密度的分子在不同的層上分離,然后可以通過各種方法進行回收。
密度梯度離心的步驟
-
通過在離心管中輕輕放置較低濃度到較高濃度來創建介質的密度梯度。
-
然后將樣品放置在梯度上方,并將試管放置在超速離心機中。
-
粒子穿過梯度,直到達到其密度與周圍介質的密度匹配的點。
-
除去和分離級分,獲得作為分離單元的顆粒。
密度梯度離心的用途
-
密度梯度離心可用于純化大量生物分子。
-
它甚至可以用于純化不同的病毒,這有助于進一步研究。
-
該技術既可以用作分離技術,又可以用于確定各種粒子的密度的技術。
密度梯度離心的例子
-
該方法用于著名的實驗中,通過使用不同的氮同位素證明DNA是半保守的。
-
另一個例子是使用該技術從肌肉勻漿中分離微粒體級分并隨后分離具有不同密度的膜囊泡。