差速離心
用于細胞分級的常用技術稱為差速離心,它用于從液體培養基中分離顆粒或將不同質量的顆粒分離成上清液的單獨部分。我們將在本課程中以多種方式使用此技術。
1.在Bio 242淀粉酶實驗室中,我們將使用離心法在酶提取物制備過程中沉淀細胞碎片和過量淀粉。可溶的酶將保留在上清液中。在實際實驗過程中,我們將使用離心分離酶(可溶性)從其底物(不溶性直鏈淀粉 - 天青)中止反應。
2.在分子實驗室中,我們將使用離心來促進微量離心管底部的少量反應物的化學反應。我們還將使用離心來制備用于轉化的細菌細胞,交替造粒,然后用不同的化學溶液重新懸浮。
3.在希爾反應實驗室中,我們將使用多步差速離心從粗細胞勻漿中分離細胞器(葉綠體)。由于細胞器的質量遠小于細胞壁組分,所以在低離心力下形成的**個顆粒主要是細胞碎片。然后在較高的離心力下沉淀細胞器部分。