離心場可用于分離溶液中的顆粒。通過使用離心機,您可以加快沉淀過程。使每個細胞遠離旋轉中心的力比地球正常重力場中細胞自身的重量大許多倍。
例如,如何使用離心場將混合物中的顆粒與血液分離?
血液由血漿(水和許多其他化合物的溶液)和懸浮液中的幾種顆粒組成,即:紅細胞,白細胞和血小板。這些細胞對于生物顆粒而言相當大 - 實際上,如果防止凝結并且血液在地球重力的1g場中過夜放置,則足夠大,以便從血漿中沉淀出來。通過使用離心機產生1500 x g的RCF ,我們可以加速沉淀過程并在大約10分鐘內將細胞與血漿分離。
為什么在離心場中發生這么快?因為在上面的例子中,使每個細胞遠離旋轉中心移動的力比地球正常重力場中細胞自身重量大許多倍 - 大1500倍。
并非所有細胞都以相同的速率沉淀:大的沉積物比小的沉淀物快。因此,如果尺寸和沉降速率存在足夠的差異,則可以將一種細胞與另一種細胞分開。
例如,血小板可以與紅細胞和白細胞分離,因為它們要小得多。只需要選擇合適的離心力和時間組合。如果血液以2900 x g旋轉僅3分鐘,則血小板將沒有時間與較重的細胞一起向下移動,并且可以從富含血小板的血漿中收集。
剛剛描述的過程在管子或其他容器的底部產生顆粒或沉淀物。顆粒上方的液體稱為上清液。從圖1中可以看出,可以從上清液中收集相當純凈的zui小顆粒。但是顆粒或更大顆粒將始終包含一些較小的顆粒,這些顆粒在離心開始之前靠近管底部。通過以各種速度和時間離心,可以從混合物中分離和收集不同尺寸的顆粒。該方法稱為 差速離心。
密度,顆粒或細胞的另一物理特性,也可用于進行分離。通過施加離心力,我們可以分離密度差異很小的顆粒。只需要調整它們將沉淀的液體的密度,使得一個密度的顆粒漂浮,并且更密集的顆粒將下沉。
還有顆粒或細胞的另一種物理特性,它們也可用于分離:密度。考慮一個蘋果,和一個大小和形狀完全相同的巖石。巖石是一種比蘋果更緊湊的材料,因此當蘋果漂浮時它會沉入水中。它具有更大的單位體積質量,這是另一種說它的密度更大的方式。密度通常表示為克/毫升(g / mL); 水的密度為1 克 /毫升。通過施加離心力,我們可以分離密度差異很小的顆粒。只需要調整它們將沉淀的液體的密度,使得一個密度的顆粒漂浮,并且更密集的顆粒將下沉。
這種方法通常用于分離淋巴細胞,一種白細胞,其大小與許多其他血細胞非常相似,以至于它們不能通過普通的沉降方法分離。但是,它們的密度低于其他細胞。如果將血樣置于密度為1.077 g / mL 的液體上然后離心,則淋巴細胞將形成漂浮帶,與大多數其他白色和紅色細胞分離良好,其密度大于1.077 g / mL,沉淀物到管的底部。血漿和血小板,zui密集的,浮動到頂部,如右圖所示。
該圖顯示了淋巴細胞的密度分離。在離心之前和之后顯示管