差速離心是一種離心過程,其中通過施加一系列增加的速度將組分分別沉降到離心管中。
差速(運動邊界)離心原理
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差異離心是基于不同大小和密度的生物顆粒沉降速率的差異。
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隨著轉子轉速的提高,較大分子的初始沉淀開始發生。
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取決于單獨離心步驟的速度和時間以及顆粒的密度和相對尺寸,其他顆粒沉降下來。
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zui大種類的顆粒在離心管底部形成沉淀,在上清液中留下較小尺寸的結構。
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然后除去沉淀,并將上清液進一步離心以獲得較小的顆粒。
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因此,較大的分子以較低的速度快速沉降,而較小的分子則需要較長的時間和較高的速度。
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如果顆粒的密度小于介質密度,則顆粒將漂浮而不是沉降。
差速(運動邊界)離心的步驟
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將樣品溶液在含有緩沖液的培養基中勻漿。
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然后將樣品放入離心管中,該離心管在特定溫度下以較低的轉子轉速運行特定的時間。
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在該操作結束時,將在管的底部形成沉淀,將其與上清液分離。
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將上清液添加到新的離心管中,在該離心管中以另一種速度離心特定的時間和溫度。
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再次,將上清液與形成的沉淀分離。
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繼續這些步驟,直到所有顆粒彼此分離。
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然后可以通過測試特定顆粒**的指示劑來識別顆粒。
差速(運動邊界)離心的用途
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差速離心通常用于分離細胞中發現的細胞器和細胞膜。
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它還可以用于核的低分辨率分離。
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由于此技術基于粒子的大小分離粒子,因此可用于識別和比較不同大小的粒子。