蔗糖梯度離心是一種密度梯度離心,其中通過改變蔗糖的濃度由蔗糖形成密度梯度。
蔗糖梯度離心原理
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蔗糖梯度離心基于以下原理:分子在離心力作用下沉降,直到它們到達密度與其密度相同的介質(zhì)。
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在這種情況下,使用具有蔗糖梯度的介質(zhì),其頂部的密度較低,而底部的密度較高。
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當樣品旋轉(zhuǎn)時,樣品中的分子會穿過介質(zhì),從而產(chǎn)生離心力。
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當密度更高的分子通過密度梯度時,它們開始向底部移動。
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然后,分子在顆粒密度等于周圍介質(zhì)的點處懸浮。
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以這種方式,具有不同密度的分子在不同的層上分離,然后可以通過各種方法進行回收。
蔗糖梯度離心的步驟
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蔗糖的密度梯度是通過將較低濃度的蔗糖輕輕放置在離心管中的較高濃度上而產(chǎn)生的。
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然后將樣品放置在梯度上方,并將試管放置在超速離心機中。
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粒子穿過梯度,直到達到其密度與周圍介質(zhì)的密度匹配的點。
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除去和分離級分,獲得作為分離單元的顆粒。
蔗糖梯度離心的用途
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蔗糖梯度離心是一種強大的技術(shù),可用于分離大分子,如DNA和RNA。
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這也已用于蛋白質(zhì)復合物的分析,并確定各種其他大分子的密度和大小。